Κιτ ELISA αντισωμάτων αντικυκλικού κιτρουλινιωμένου πεπτιδίου (CCP)

Αυτό το κιτ ανιχνεύει αντισώματα κατά των κυκλικών κιτρουλλινωμένων πεπτιδίων (αντισώματα CCP) σε δείγματα ανθρώπινου ορού με βάση την έμμεση μέθοδο, με καθαρισμένα αντιγόνα κυκλικών κιτρουλλινωμένων πεπτιδίων που χρησιμοποιούνται ως αντιγόνο επικάλυψης.

Η διαδικασία δοκιμής ξεκινά με την προσθήκη του δείγματος ορού σε φρεάτια αντίδρασης που έχουν προ-επικαλυφθεί με τα προαναφερθέντα καθαρισμένα αντιγόνα, ακολουθούμενη από μια περίοδο επώασης. Κατά τη διάρκεια αυτής της επώασης, εάν υπάρχουν αντισώματα CCP στο δείγμα, αυτά θα αναγνωρίσουν και θα συνδεθούν ειδικά με τα κυκλικά κιτρουλλινωμένα πεπτιδικά αντιγόνα που είναι επικαλυμμένα στις μικροφρεάτια, σχηματίζοντας σταθερά σύμπλοκα αντιγόνου-αντισώματος. Για να διασφαλιστεί η ακρίβεια των επόμενων βημάτων, τα μη συνδεδεμένα συστατικά στα φρεάτια αντίδρασης απομακρύνονται μέσω μιας διαδικασίας πλύσης, η οποία βοηθά στην εξάλειψη πιθανών παρεμβολών από άλλες ουσίες στον ορό.

Στη συνέχεια, τα συζεύγματα ενζύμων προστίθενται στα φρεάτια αντίδρασης. Μετά από μια δεύτερη επώαση, αυτά τα συζεύγματα ενζύμων θα προσκολληθούν ειδικά στα υπάρχοντα σύμπλοκα αντιγόνου-αντισώματος, σχηματίζοντας ένα μεγαλύτερο ανοσοσύμπλοκο που περιλαμβάνει το αντιγόνο, το αντίσωμα και το συζεύγμα ενζύμου. Όταν το διάλυμα υποστρώματος TMB εισάγεται στο σύστημα, το ένζυμο στο συζεύγμα καταλύει μια χημική αντίδραση με το υπόστρωμα TMB, με αποτέλεσμα μια ορατή αλλαγή χρώματος. Η ένταση αυτής της χρωματικής αντίδρασης σχετίζεται άμεσα με την ποσότητα των αντισωμάτων CCP που υπάρχουν στο αρχικό δείγμα ορού. Τέλος, χρησιμοποιείται ένας αναγνώστης μικροπλάκας για τη μέτρηση της απορρόφησης (τιμή A) του μείγματος αντίδρασης. Αναλύοντας αυτήν την τιμή απορρόφησης, το επίπεδο των αντισωμάτων CCP στο δείγμα μπορεί να προσδιοριστεί με ακρίβεια, παρέχοντας μια αξιόπιστη βάση για σχετικές κλινικές δοκιμές και διάγνωση.